الكروماتوغرافيا التحضيرية هي عملية عزل مادة من عينة باستخدام كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء (HPLC)، غالبًا بكميات كبيرة، وذلك عن طريق جمع أجزاء الذروة المفصولة عند خروجها من الكاشف. الهدف الأساسي من الفصل على مقياس تحليلي هو إنتاج كروماتوغرام يحتوي على ذروات واضحة، ومفصولة جيدًا، ومتناظرة توفر المعلومات التحليلية المطلوبة.
أما الغرض من كروماتوغرافيا السائل التحضيرية (Preparative HPLC) فهو إنتاج كمية من مادة نقية بأكبر قدر ممكن من السهولة والاقتصاد، ومن ثم ترسيب العينة في وعاء جمع قبل استخلاصها من السائل الحامل (eluent). تُعتبر كروماتوغرافيا HPLC التحضيرية أكثر تكلفة من عمليات التنقية التقليدية مثل التقطير، والتبلور، والاستخلاص، مما يجعلها مناسبة فقط للمواد النادرة أو المكلفة. ومع ذلك، فإنها تتطور لتلبية الطلب المتزايد على المواد الكيميائية عالية النقاء المستخدمة في دراسات النشاط، والسمّية، والفحص الدوائي.
تُستخدم كروماتوغرافيا HPLC التحضيرية في الصناعات الكيميائية والدوائية، وكذلك في التقنية الحيوية والكيمياء الحيوية، لعزل وتنقية المنتجات المهمة. تختلف كمية المادة المطلوب عزلها أو تنقيتها بشكل كبير حسب مجال العمل. فعلى سبيل المثال، في عزل الإنزيمات بالتقنية الحيوية، تبدأ الكمية من مستوى الميكروغرام (µg). وهنا يُشار إلى العملية بـ "التنقية الدقيقة" (micro purification). في الكيمياء العضوية التخليقية أو كيمياء المنتجات الطبيعية، نحتاج إلى جزيئات نقية بكميات تتراوح من ميليغرام إلى عدة ميليغرامات لتحديد هوية المركب وبنيته. أما المعايير والمركبات المرجعية والمواد المستخدمة في الدراسات السمية والدوائية فتتطلب كميات أكبر تُقاس بالـغرامات. الهدف الأساسي من الكروماتوغرافيا التحضيرية يتم تقييمه بناءً على ثلاثة معايير رئيسية: نقاوة المنتج - المردو د- معدل الإنتاج.
لا يمكن تحسين طرق HPLC التحضيرية لجميع هذه المعايير معًا، بسبب ترابطها وتأثير كلٍ منها على الآخر. العمود الكروماتوغرافي هو عنصر حاسم في إنشاء طريقة تحضيرية قوية وقابلة للتكرار.
في الفصل التحليلي، يتم افتراض سلوك مشابه لإيزوثرمات لانغموير والالتزام الدقيق بمعادلة الفصل (resolution equation). لكن في HPLC التحضيرية، حيث تُحمَّل الأعمدة بانتظام وبكثافة، لم تعد هذه العلاقات تنطبق بشكل كمي. في HPLC التحليلي، يتم تعريف قدرة العمود عادةً على أنها انخفاض بنسبة 10% في الكفاءة بسبب كتلة العينة المحقونة. أما في الكروماتوغرافيا التحضيرية، فإن كمية العينة المحقونة قد تتجاوز قدرة العمود بمقدار عشرة أضعاف أو أكثر، ولذلك لا يتم تحديدها بقيمة مطلقة. يحدث التحميل الزائد (Overload) عندما لا يمكن عزل المنتج بالنقاء أو المردود المطلوبين بسبب التحميل المفرط. يجب أن تأخذ قدرة العمود في الاعتبار وجود الجزيئات الأخرى في العينة، بما في ذلك المصفوفة. عند الحديث عن السعة، نشير إلى سعة العينة وليس "معامل السعة" الذي يقيس الاحتفاظ بالمحلل.
الهدف من التنقية التحضيرية هو إنتاج أكبر كمية ممكنة من المادة المنقاة في كل حقن.
خطوات تطوير طريقة كروماتوغرافيا تحضيرية : تحسين الفصل الأولي باستخدام عمود تحليلي صغير الحجم. تحميل العمود الزائد تدريجيًا مع الحفاظ على فصل كافٍ للمكونات المهمة. التوسع في العمود إلى حجم تحضيري مناسب استنادًا إلى كمية المركب المطلوب تنقيته، باتباع الإرشادات السابقة.
عادةً ما يتم اختيار الأعمدة التحليلية بناءً على توفر أعمدة تحضيرية بنفس مادة الحشو، سواء كانت معبأة مسبقًا أو متوفرة كوسائط سائبة للتعبئة الذاتية. وقبل تطوير وتحسين طريقة تحضيرية، من المهم توفر أعمدة تحليلية وتحضيرية من نفس مادة التعبئة.
تتوفر تجاريًا بأحجام وأنواع مختلفة. توفر شركة Agilent Technologies مجمعات كسور مخصصة لثلاثة نطاقات تدفق: مجمع ميكرو (Micro Fraction Collector) لسرعات تدفق أقل من 100 ميكرولتر/دقيقة. مجمع تحليلي (Analytical Scale) لسرعات أقل من 10 مل/دقيقة.
مجمع تحضيري (Preparative Scale) لسرعات تصل إلى 100 مل/دقيقة.
بعض الأجهزة تجمع بين محقن آلي (Auto-sampler) ومجمع الكسور في منصة واحدة، باستخدام إبرة وصمام واحد لكل من الحقن وجمع الكسور. أجهزة أخرى تستخدم وحدتين منفصلتين: واحدة للحقن، وأخرى لجمع الكسور.