التحليل الطيفي بالأشعة فوق البنفسجية والمرئية

يمكن لبيانات التحليل الطيفي UV-Vis أن توفّر معلومات نوعية (كيفية) وكمّية عن مادة أو جزيء معيّن. سواء كنت تسعى للحصول على معلومات نوعية أو كمّية، يجب استخدام خلية مرجعية لضبط الجهاز على صفر مع المذيب الذي توجد فيه المادة. للحصول على معلومات كمّية، يجب معايرة الجهاز باستخدام تراكيز معروفة من المركّب محل الدراسة مذابة في نفس المذيب المستخدم في العينة المجهولة. أما إذا كانت المعلومات المطلوبة تتعلق فقط بتأكيد وجود المركب في العينة، فلا حاجة لمنحنى المعايرة؛ ولكن إذا كان الغرض من التحليل دراسة تحلّل مادة أو تفاعل كيميائي ويُطلب قياس تركيز المركّب، فيجب إنشاء منحنى معايرة.

لإنشاء منحنى معايرة، يجب استخدام ثلاث تراكيز على الأقل من المادة، ويفضّل استخدام خمسة تراكيز للحصول على منحنى أكثر دقة. يجب أن تبدأ التراكيز بقيمة أعلى قليلاً من التركيز المتوقع للعينة المجهولة، وتنخفض تدريجيًا لتصل إلى تركيز يقل بحوالي مرتبة واحدة عن أقصى تركيز. يجب أن تكون الفواصل بين التراكيز متساوية نسبيًا، وأن يتم تحضير المحاليل بأكبر قدر ممكن من الدقة باستخدام ماصّات رقمية وقوارير قياسية، وليس باستخدام الأسطوانات المدرجة أو البيكرات.

يتم استخدام قيم الامتصاص في أقصى طول موجي يمتص فيه المركب لإنشاء منحنى المعايرة. ويُعتبر منحنى المعايرة مقبولًا إذا كان معامل الارتباط لا يقل عن 0.9. إذا كان أقل من ذلك، يُنصح بإعادة تحضير المحاليل، لأن المشكلة قد تكون ناتجة عن خطأ بشري. ومع ذلك، إذا استمر عدم تطابق المعايرة بعد عدة محاولات، فقد تكون هناك مشكلة في الجهاز نفسه؛ على سبيل المثال، قد تكون المصابيح بدأت بالتلف